INGENIERIE GENOMIQUE – LA TECHNIQUE DU CRISPR – CAS9
Biotechnologies
Objectifs
Comprendre et savoir mettre en œuvre la technique du CRISPR –CAS9
Contenu pédagogique
Introduction :
- Rappel des Techniques de Transgénèse & Ingénierie Génomique
- Origine et principe de la technologie CRISPR/CAS9
- Rappel des techniques de clonage moléculaire
Mise en œuvre de la technique :
- Paramètres définissant l’efficacité et la spécificité de CRISPR/Cas9
- Prédiction informatique des ARN guides
- Stratégies de conception d’un repair template
- Les méthodes de sélection
- Prise en compte des mutations imprévues « off-target »
- Les limites de la technique
Applications système eucaryote ou procaryote
- Etudes de cas / Travaux dirigés
- Design d’une stratégie de knock-out (sans repair template, NHEJ)
- Design d’une stratégie de knock-out (avec repair template, HDR)
- Design d’une stratégie de knock-in
- Choix d’une méthode de sélection