TECHNIQUES IMMUNOENZYMATIQUES – ELISA Perfectionnement
Biotechnologies
Objectifs
Présenter les techniques immunoenzymatiques et leurs applications.
Développer la mise au point de méthodes et la validation des méthodes.
Contenu pédagogique
Rappels sur les techniques immunologiques
Principe de la réaction immunologique
Définition antigène et anticorps
Structure des anticorps
Caractérisation de la réaction antigène – anticorps
« Outils » nécessaires à la réalisation des techniques immunologiques
anticorps monoclonaux, marqueurs, conjugués
Les techniques d’immunodiffusion
Mise au point de méthode ELISA
Définition des formats de tests
Equipement et matériel de laboratoire
Identification des supports et des réactifs
Définition des paramètres d’optimisation
Description des problèmes de développement fréquemment rencontrés
Définition des critères d’acceptation
Etude de robustesse (étude de reproductibilité, étude des réactions croisées, étude de stabilité du test et des échantillons)
Validation d’une méthode ELISA
Définition des niveaux de contrôle
Définition des paramètres de validation (précision, justesse, zone dynamique de dosage, parallélisme, sélectivité, effet dilution)
Etudes de cas
Stratégie décisionnelle basée sur l’analyse de résultats issus de développement et de validation de tests ELISA